服務(wù)介紹:
本公司采用的試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中待測(cè)指標(biāo)的水平。用純化的單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的待測(cè)抗原會(huì)與單抗結(jié)合,游離的成分被洗去。加入生物素化的抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素。生物素與親和素特異性結(jié)合;生物素化的抗體與結(jié)合在單抗上的抗原結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物,若反應(yīng)孔中有待測(cè)物質(zhì),辣根過(guò)氧化物酶會(huì)使無(wú)色的顯色劑變藍(lán)色,加終止液變黃。在450nm處測(cè)OD值,待測(cè)物質(zhì)的濃度與OD450值之間呈正比,可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)的濃度。
實(shí)驗(yàn)流程(具體步驟以說(shuō)明書為準(zhǔn))
1.請(qǐng)客戶明確待測(cè)樣本的種屬、來(lái)源、數(shù)量
2.收集樣本
3.訂購(gòu)相應(yīng)的ELISA試劑盒
4.實(shí)驗(yàn)完成,交付結(jié)果
備注:客戶在收集樣本前必須清楚檢測(cè)的成份是否穩(wěn)定,需要周期收集樣本,請(qǐng)將樣本及時(shí)分裝后儲(chǔ)存在
-20℃或-70℃,因冰室與室溫溫差較大,蛋白極易降解,所以請(qǐng)避免反復(fù)凍融。
①.血清:室溫自然凝固10-20分鐘,3000轉(zhuǎn)/分,離心20分鐘,收集上清
②.血漿:一般選用EDTA作為抗凝劑,混合10分鐘后,3000轉(zhuǎn)/分,離心20分鐘,收集上清
③.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)細(xì)胞分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集;檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)
稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到106/ml左右,通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞釋放胞內(nèi)成份,3000轉(zhuǎn)/分,
離心20分鐘,收集上清,
④.樣本保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心,
⑤.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧
化物酶(HRP)的活性。
提供結(jié)果
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線
2.各樣本的OD值,濃度值
3.完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告
聯(lián)系我們: [email protected]QQ:2087359904微信:18001933641
我們將根據(jù)您要檢測(cè)的內(nèi)容提供詳細(xì)報(bào)價(jià)清單!