無菌檢查法系用于檢査藥典要求無菌的藥品生物制品、醫(yī)療器具、原料、輔料及其他品種是否無菌的一種方法。
試驗(yàn)前準(zhǔn)備
無菌檢驗(yàn)需在潔凈度達(dá)到100級(jí)或以上的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，并確保該實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)指標(biāo)均符合GB50073—2001《潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范》以及GB／T16292～16294—1996《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法》等相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。同時(shí)，洗脫液、需氧一厭氧培養(yǎng)基與真菌培養(yǎng)基的制備需遵循衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版)的要求。
在無菌檢驗(yàn)前三天，需在需氧一厭氧培養(yǎng)基與真菌培養(yǎng)基中分別接種1ml洗脫液，并在適宜的溫度下培養(yǎng)72小時(shí)，以確保無菌生長(zhǎng)。此外，還需制備陽性對(duì)照管菌液，包括金黃色s葡萄球菌、生孢梭菌以及白念珠菌的稀釋液。
微生物無菌檢查法的對(duì)照用菌液制備：
1、無菌檢查法的對(duì)照用菌液—金黃色s葡萄球菌（Staphylococcus aureus）菌液取金黃色s葡萄球菌[CMCC(B)26003]的營養(yǎng)瓊脂斜面新鮮培養(yǎng)物1白金耳，接種至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基內(nèi)，在30～35℃培養(yǎng)16～18小時(shí)后，用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至每1ml中含10～100個(gè)菌。
2、無菌檢查法的對(duì)照用菌液—生孢梭菌（Clostridium sporogenes）菌液取生孢梭菌[CMCC(B)64941]的需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基新鮮培養(yǎng)物1白金耳，接種至相同培養(yǎng)基內(nèi)，在30～35℃培養(yǎng)18～24小時(shí)，用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至每1ml中含10～100個(gè)菌。
3、無菌檢查法的對(duì)照用菌液—白色念珠菌（Candida albicans）菌液取白色念珠菌[CMCC(F)98001]的真菌瓊脂培養(yǎng)基斜面新鮮培養(yǎng)物1白金耳，接種至真菌培養(yǎng)基內(nèi)，在20～25℃培養(yǎng)24小時(shí)后，用0.9%無菌氯化鈉溶液稀釋至每1ml中含10～100個(gè)菌。
